Estudi dels mecanismes moleculars implicats en la sensibilització a l'apoptosi en cèl·lules de carcinoma d'endometri

Resumen

L#objectiu principal d#aquest treball ha estat identificar i caracteritzar els mecanismes moleculars pels quals les cèl.lules de carcinoma d#endometri evadeixen la mort cel.lular en resposta a diferents teràpies antitumorals. L#obra s#enmarca en l#estudi de la senyalització per receptors de mort, concretament per TRAIL i Fas, però també s#han utilitzat altres agents que actualment ja s#estan utilitzant en pacients en el tractament d#altres neoplàsies com el mieloma múltiple o el carcinoma de ronyó i que, com en aquest treball, continuen essent objecte d#estudi per una possible aplicació en altres tipus de tumors. En aquest treball s#ha intentat realitzar un anàlisi de la senyalització iniciada pels lligands TRAIL i Fas tenint en compte la seva possible utilitat com a teràpia per si sola o en combinació amb altres drogues. Per realitzar-lo s#ha treballat principalment en el cultiu de línies cel.lulars de carcinoma d#endometri i també amb cultius primaris de biòpsies de pacients. En primer lloc hem determinat que les cèl.lules canceroses endometrioides són resistents als tractaments convencionals a través de receptors de mort i hem identificat el que esdevé el primer mecanisme de resistència en aquestes cèl.lules: FLIP. Hem observat que l#inhibició de l#expressió de FLIP mitjançant RNA d#interferència sensibilitza les cèl.lules de carcinoma d#endometri a l#apoptosi induida per TRAIL i Fas. També s#ha pogut observar que FLIP es troba sobreexpressat en aproximadament el 40% dels carcinomes d#endometri. A partir d#aquí, tot l#estudi es focalitza principalment en desxifrar quines proteïnes són les encarregades de modular l#expressió i estabilitat d#aquesta proteina. És en aquest context on al llarg del temps ens hem anat trobant proteïnes com la casein cinasa-2 (CK2), B-Raf o la cinasa supressora de Ras 1 (KSR1); totes elles implicades en la regulació de la mort induïda per TRAIL i Fas a través de FLIP. Hem pogut comprovar que la casein cinasa-2 és capaç de regular a nivell d#expressió génica i a nivell postraduccional l#estabilitat de FLIP i com l#ús tant d#inhibidors farmacològics de l#activitat CK2 com de shRNA enfront la subunitat reguladora de CK2 (CK2ß) sensibilitza aquestes cèl.lules al tractament per TRAIL i Fas. També s#ha pogut comprovar fent ús d#un array matricial de teixits que CK2ß es trova altament expressada en el carcinoma d#endometri reforçant així els resultats dels nostres estudis previs. Finalment tampoc hem menystingut el que possiblement sigui l#objectiu últim en el camp de la recerca oncológica, és a dir, l#aplicació pràctica, el disseny i desenvolupament de drogues candidates a ser administrades en pacients humans. És per aquesta raó que també ens hem centrat en l#estudi dels efectes que determinades drogues (que actualment ja han assolit totes les fases clíniques) com el Sorafenib o el Bortezomib puguin tenir en el carcinoma d#endometri.