Bases moleculares de la transicion de fase en la biosintesis de carotenoides de la bacteria fototrofica rhodobacter sphaeroides, 2.4.1

Resumen

El objetivo principal de esta tesis ha sido determinar el mecanismo segun el cual se produce un fenomeno de transicion de fase en la sintesis de carotenoides en la cepa 2.4.1 de rhodobacter sphaeroides. Para conseguirlo se han estudiado los siguientes aspectos: (i) la cuantificacion y caracterizacion de la variabilidad de pigmentacion en diferentes cepas de rhodobacter sphaeroides y la descripcion de la transicion de fase en la cepa 2.4.1, (ii) el aislamiento y estudio de la region que contiene los genes de carotenoides de la cepa 2.4.1 y la localizacion del gen afectado en la transicion de fase, (iii) y el estudio de las causas moleculares por las que se produce la transicion de fase. La sintesis de carotenoides en la cepa 2.4.1 de la bacteria fototrofica rhodobacter sphaeroides presenta un proceso espontaneo de mutacion con una frecuencia muy elevada que provoca la aparicion alternativa de clones rojos (silvestres) y verdes (mutantes). Presentamos en este trabajo que el gen crtd no es funcional en los mutantes verdes como consecuencia de la adicion espontanea de una guanina en una region homopolimerica de 7 guaninas, situadas en el extremo 5' del gen crtd. Todos los clones revertientes (silvestres) aislados del mutante verde, presentan la perdida de una guanina en la misma region y por tanto la recuperacion del marco de lectura y de la funcion del gen crtd. Hemos comprovado como este proceso solo se da en la cepa 2.4.1 y no en otras cepas de rhodobacter sphaeroides conteniendo un plasmido recombinante, portador del gen crtd de un mutante verde espontaneo de la cepa 2.4.1 de rhodobacter sphaeroides.