B cell antibody repertoire in a mouse model of sjögren's syndrome

Resumen

El síndrome de Sjögren (SjS) es una de las enfermedades autoinmunes sistémicas crónicas más comunes que principalmente afecte a las glándulas exocrinas, ocasionando una progresiva sequedad en boca y ojos. Los puntos de control de la maduración de las células B que regulan la auto-tolerancia parecen estar alterados en enfermedades autoinmunes como en el caso del SjS. A pesar de las evidencias acumuladas de profundas alteraciones de la inmunidad humoral de las células B, queda por determinar el repertorio y el inicio de la auto-reactividad de las células B en el SjS. El presente trabajo pretende estudiar el repertorio de células B de ratones NOD.H-2h4, un modelo de ratón de autoinmunidad espontánea que imita al SjS sin desarrollar diabetes. En estudios anteriores en nuestro grupo se ha demostrado que todas las hembras presentaron infiltrados en glándulas salivales y autoanticuerpos como anti-dsDNA y anti-Ro52, ambos característicos del SjS, a las 24 semanas de edad. Nuestra hipótesis es que los ratones SjS tendrán una mayor frecuencia de células B auto-reactivas con una evolución progresiva hacia la oligoclonalidad impulsada por antígenos. Por lo que, creamos una biblioteca de 456 hibridomas de esplenocitos de ratones NOD.H-2h4 a diferentes edades (4, 7, 28, 47 y 66 semanas de edad). La presencia de autoanticuerpos mono o poli-reactivos contra dsDNA, Ro52, LPS, insulina, histonas y OVA se evaluó mediante ELISA y sus patrones de tinción celular mediante IFA y FACS. Observamos un alto porcentaje de auto-reactividad entre los hybridomas de ratones NOD.H-2h4. La auto-reactividad de los anticuerpos IgM como los IgG aumentaron con la edad en los ratones NOD.H-2h4, comparándolos con ratones C57BL/6. Curiosamente, todos los autoanticuerpos anti-Ro52 fueron poli-reactivos. Nuestros resultados indican que en el modelo de ratón NOD.H-2h4 de SjS, las células B IgG+ son principalmente poli-reactivas y podrían expandirse siguiendo un proceso de selección positivo dirigido por antígenos desconocidos. Estudios como este, junto con la nueva tecnología capaz de identificar y estudiar mejores repertorios de células B de los individuos, serían útiles para comprender mejor el mecanismo patológico subyacente de muchas enfermedades autoinmunes y, por lo tanto, para desarrollar y diseñar nuevas estrategias terapéuticas.