Ensayo piloto de trasplante pulmonar porcino para el análisis de la lesión de isquemia-reperfusión tras isquemia fría prolongada

  1. Santamaría Gómez, Maite
Dirigida per:
  1. Amaya Ojanguren Arranz Director/a
  2. Sonia Gatius Calderó Codirectora

Universitat de defensa: Universitat de Lleida

Fecha de defensa: 30 de de setembre de 2021

Tribunal:
  1. Cristina Berastegui President/a
  2. Mariona Badía Secretària
  3. Esther Fernández Vocal

Tipus: Tesi

Teseo: 687614 DIALNET lock_openTDX editor

Resum

El temps d'isquèmia de l'injert és un tema controvertit en el trasplantament pulmonar degut a que es va establir de forma arbitrària. Per aquest motiu l'objectiu d'aquest estudi és analitzar l'impacte del temps d'isquèmia freda (CIT) perllongat sobre la lesió IR en un model experimental. Assaig pilot experimental aleatoritzat de grups paral·lels i anàlisi cec final utilitzant un model de TP en porcs. Es van extreure els òrgans dels animals donants (n = 8). Els pulmons es van conservar durant 6 hores (n = 4) o 12 hores (n = 4) en hipotèrmia aeròbica. El pulmó esquerre es va trasplantar i es va reperfundir durant 4 hores. Es van obtenir biòpsies de pulmó (i) a l'inici del CIT, (ii) a la fi del CIT, (iii) 30 minuts després de la reperfusió i (iv) 4 hores després de la reperfusió. Els empelts de pulmó es van avaluar histològicament mitjançant la puntuació de dany histològic pulmonar i la relació de pes humit i pes sec. La resposta inflamatòria es va valorar mitjançant la determinació de citoquines inflamatòries. Es va determinar l'activitat de caspasa-3 com a marcador d'apoptosi. No observem diferències en la puntuació de dany histològic pulmonar o en la relació de pes humit i pes sec en un moment donat entre els pulmons sotmesos a 6 h-CIT o 12 h-CIT. Les IL-1 i IL-6 van mostrar una tendència ascendent durant la reperfusió en els dos grups. El TNF-a va aconseguir el seu punt màxim dins dels 30 minuts posteriors a la reperfusió. Tot just es va detectar IFN-g. La inmunoexpressió de caspasa-3 es va classificar semiquantitativament pel percentatge de cèl·lules tenyides. Es va observar un 30% de cèl·lules apoptòtiques 30 minuts després de la reperfusió. Observem que 6 i 12 hores de CIT van ser equivalents en termes de dany histològic pulmonar, perfil inflamatori i apoptosi en un model de TP en porcs. L'extensió de la lesió pulmonar, mesurada per la puntuació de dany histològic pulmonar, les citoquines proinflamatòries i la determinació de caspasa-3 va ser lleu.