Ensayo piloto de trasplante pulmonar porcino para el análisis de la lesión de isquemia-reperfusión tras isquemia fría prolongada

Resumen

El tiempo de isquemia del injerto es un tema controvertido en el trasplante pulmonar debido a que se estableció de forma arbitraria. Por este motivo el objetivo de este estudio es analizar el impacto del tiempo de isquemia fría (CIT) prolongado sobre la lesión de isquemia-reperfusión (IR) en un modelo experimental. Ensayo piloto experimental aleatorizado de grupos paralelos y análisis ciego final utilizando un modelo de TP en cerdos. Se extrajeron los órganos de los animales donantes (n = 8). Los pulmones se conservaron durante 6 horas (n = 4) o 12 horas (n = 4) en hipotermia aeróbica. El pulmón izquierdo se trasplantó y reperfundió durante 4 horas. Se obtuvieron biopsias de pulmón (i) al comienzo del CIT, (ii) al final del CIT, (iii) 30 minutos después de la reperfusión y (iv) 4 horas después de la reperfusión. Los injertos de pulmón se evaluaron histológicamente mediante la puntuación de daño histológico pulmonar y la relación de peso húmedo y peso seco. La respuesta inflamatoria se valoró mediante la determinación de citoquinas inflamatorias. Se determinó la actividad de caspasa-3 como marcador de apoptosis. No observamos diferencias en la puntuación de daño histológico pulmonar o en la relación de peso húmedo y peso seco en un momento dado entre los pulmones sometidos a 6 h-CIT o 12 h-CIT. Las IL-1􀀀 e IL-6 mostraron una tendencia ascendente durante la reperfusión en ambos grupos. El TNF-a alcanzó su punto máximo dentro de los 30 minutos posteriores a la reperfusión. Apenas se detectó IFN-g. La inmunoexpresión de caspasa-3 se clasificó semicuantitativamente por el porcentaje de células teñidas. Se observó un 30% de células apoptóticas 30 minutos después de la reperfusión. Observamos que 6 y 12 horas de CIT fueron equivalentes en términos de daño histológico pulmonar, perfil inflamatorio y apoptosis en un modelo de TP en cerdos. La extensión de la lesión pulmonar, medida por la puntuación de daño histológico pulmonar, las citoquinas proinflamatorias y la determinación de caspasa-3 fue leve.